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生薬抽出エキスを添加した3000 cells/wellのPANC-1の細胞生存率 (N=1)
生薬抽出エキスを添加した3000 cells/wellのPANC-1の細胞生存率 (N=1)

探索研究

測定種別 コントロール比
動物種 ヒト
試験結果表示方法 (sampleの450 nmの吸光度-650 nmの吸光度/controlの450 nmの吸光度-650 nmの吸光度)×100 (%) を細胞生存率とした。
試験目標 がん
試験レベル Cell-based
試験プロトコール 1) PANC-1は4.5 g/Lグルコースを含む「D-MEM (10%FCS、200 mM グルタミン、100U/ml、100 mg/mlストレプトマイシン/ペニシリン)で培養された。
2) 生薬抽出エキスは、0.22 μmのフィルターでろ過して滅菌した。controlとしてオートクレーブ滅菌水を0.22μmのフィルターでろ過して用いた。
3) 細胞は3000 cells/well (9.6×104 cells/cm2) で96well plateを播種し、37℃でインキュベートした。24時間後に培地交換を除去し、、phosphate-buffered saline (PBS) で3回washしてから、wellあたり97 μLの新しい培地を入れた。生薬抽出エキスは3.0 μL加えて、最終濃度10 、30、100、300 μg/mLにした。 (N=1)
細胞を入れないwellにおいても同様に生薬抽出エキスを入れてblank用のplateとした。
4) 生薬エキスを入れてから24時間後に、培地を除去し、PBSで3回washしてから、100 μLの新しい培地を加えた。WST-8試薬を10 μL加えて、37度で3時間インキュベートした。
5) sampleとblankのそれぞれのwellについて、450 nmの吸光度と650 nmの吸光度を測定し、450 nmの吸光度から650 nmの吸光度の差を求めた。
6) (sampleのA450-A650の値/controlのA450-A650)×100 (%) を、controlに対する細胞生存率とした。
備考  
【試験結果表示】
表示方法 生薬 方剤 化合物 生薬-化合物
試験薬物名